江蘇吉泰肽業(yè)科技有限公司
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二甲基亞砜(DMSO)是一種含硫有機化合物,分子式為(CH3)2SO,常溫下為無色無臭的透明液體。DMSO作為冷凍保護劑經(jīng)常應用于細胞庫。在細胞冷凍過程中,DMSO可防止胞內(nèi)/胞外晶體的形成,其工作濃度為10%。DMSO通常可與鹽或血清白蛋白結(jié)合。
疏水性多肽可以很容易地溶解在DMSO中。但DMSO可增加細胞的通透性,若多肽溶解于DMSO中則會對細胞產(chǎn)生毒性作用。高濃度的DMSO絕不可應用于細胞培養(yǎng)中。濃度為5%的DMSO即可讓細胞膜溶解。大多數(shù)細胞株可以容忍0.5% DMSO,少許可以容忍1%的濃度,而不表現(xiàn)出嚴重的細胞毒性。然而原代細胞培養(yǎng)對其更敏感。所以如果是用原代細胞做劑量/反應曲線(可行性),其濃度應低于0.1%。
對于某些疏水性非常高的多肽,可先嘗試將其溶解在少量的DMSO(30-50ul,100%)中,然后慢慢 (一滴一滴地)將其添加到不斷攪拌的水溶液如PBS或其他想要的緩沖液中,直至理想濃度。如果滴加過程中,肽溶液開始變渾濁,說明已經(jīng)達到了溶解極限。另外,超聲波有助于多肽溶解。
經(jīng)驗:
對幾乎所有的細胞來說,濃度為0.1%DMSO是安全的。
廣泛被用于細胞培養(yǎng)的DMSO終濃度為0.5%,不會引起細胞毒性。
雖然對部份細胞來說,1%DMSO也不會產(chǎn)生細胞毒性,但我們推薦0.5%。
也有5%DMSO成功地應用于某些細胞的案例。
始終保持終濃度在0.5%,但儲存時可200倍高濃度溶于100%的DMSO中。